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Tg(mpl:eGFP)smu4,動物試驗

原創發布者:北檢院    發布時間:2023-02-24     點擊數:

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注意:因業務調整,暫不接受個人委托測試望見諒。

基本信息

品系名稱:Tg(mpl:eGFP)smu4

英文名稱:Tg(mpl:eGFP)smu4

疾病名稱:NA

相關基因:i

背景品系:AB

遺傳類型:染色體顯性遺傳

繁殖方式:側交

繁殖代數:第5代

研究用途:用于血小板生成,血小板相關疾病病理機制的研究以及藥物評估篩選。

飼養環境:斑馬魚養殖系統,28.5℃

培育單位:南方醫科大學

保種單位:華南理工大學醫學院

資源鑒定:已通過實驗動物模型鑒定與評價工作委員會鑒定

鑒定日期:2020-05-02 00:00:00

特征描述

1. Tg(mpl:eGFP)smu4轉基因系斑馬魚的表達譜

mpl-GFP陽性(mpl:eGFP +)細胞(血小板及血小板前體細胞)在波長488的激發光照射下發出綠色熒光,可以在熒光顯微鏡下直接觀察與計數。

mpl:eGFP+ 細胞與mpl的WISH(原位雜交染色)染色結果類似,約40hpf時從主動脈-性腺-中腎(AGM)和CHT區出現,隨后在CHT和循環中迅速增加,從2dpf出現在血液循環中,從8dpf開始逐漸減少,最后在11dpf左右時熒光消失。(如圖2所示)。

2. Tg(mpl:eGFP)smu4轉基因系斑馬魚的組織特異性

免疫組化抗體染色實驗顯示,mpl:eGFP表達既不與髓樣細胞(Lcp1+)重疊也不與紅細胞(Hbae1+)重疊,但與少量gata1+紅系前體細胞(gata1:DsRed+)重疊(圖3), 說明mpl:eGFP陽性細胞特異性標記gata1細胞衍生的血小板,不標記髓系細胞和紅系細胞。

3. Tg(mpl:eGFP)smu4斑馬魚限定為血小板細胞的表型

比較mpl:eGFP和cd41:eGFP細胞群,mpl:eGFP陽性細胞群中的血小板標記基因cd42akif1b,lrrc32nfe表達量更高,說明mpl:eGFP比cd41:eGFP更特異地標記了血小板(圖4 A)。mpl:eGFP 主要(約90%)標記細胞質稀少且細胞核濃縮的血小板細胞和血小板前體細胞,而cd41:eGFP細胞卻含有一小部分(30%)與HSPC對應的較大細胞(圖4 B-D)。

4. mpl:eGFP陽性細胞為有功能的血小板細胞

Tg(mpl:eGFP)smu4斑馬魚的血管損傷后,循環中的mpl:eGFP+細胞可以到達傷口并發生凝結堵塞傷口(如圖5所示)。

5. mpl:eGFP陽性細胞受血小板生成信號通路調控

Tg(mpl:eGFP)smu4斑馬魚中過表達tpo的mRNA,血液中CHT造血區的mpl:eGFP+陽性細胞的表達會顯著增加。在Tg(mpl:eGFP)smu4斑馬魚中導入注射用的重組人IL-11,mpl:eGFP+細胞的表達也顯著增加(如圖6所示)。

動物簡介

Tg(mpl:eGFP)smu4是特異性標記血小板的轉基因系斑馬魚,特異性將血小板細胞標記為明亮的綠色熒光細胞,而幾乎不標記造血干祖細胞和其他造血譜系的細胞。(如圖1所示)

營養成分

斑馬魚是雜食性動物,成年魚每天投喂2到3次,喂食量以5分鐘左右吃完為佳。本實驗室常用魚食有鹽水蝦和固體顆粒魚食。

生物學特性

暫無介紹

遺傳信息

mpl啟動子驅動GFP綠色熒光蛋白,本轉基因系中的mpl啟動子為mpl基因(ID:ENSDARG00000039222)轉錄本上游的4651bp區域。

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

Tg(mpl:eGFP)smu4,動物試驗流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(Tg(mpl:eGFP)smu4,動物試驗)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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