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B6-Ifnar1tm1小鼠,動物試驗

原創發布者：北檢院發布時間：2023-02-27 點擊數：

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基本信息

品系名稱：B6-Ifnar1^tm1小鼠

英文名稱：B6-Ifnar1^tm1

疾病名稱：免疫缺陷疾病

相關基因：Ifnar1

背景品系：C57BL/6J

遺傳類型：基因敲除近交系

繁殖方式：HOM X HOM

繁殖代數：6代

研究用途：IFNar1基因敲除小鼠，缺乏的I型干擾素功能，因干擾素作為抗御病毒的侵害的第一道防線，比機體的免疫反應早幾小時至幾天的時間發揮抗病毒作用，因此，IFN受體缺損的小鼠對病毒的感染變得特別敏感。此小鼠對于探明動物機體抵抗病毒感染具有重要的意義，該模型有可能作為研究機體抵抗病毒感染的機制的理想工具。

飼養環境：隔離或屏障設施

培育單位：北京華阜康生物科技股份有限公司

保種單位：北京華阜康生物科技股份有限公司

資源鑒定：已通過實驗動物模型鑒定與評價工作委員會鑒定

鑒定日期：2020-04-29 00:00:00

特征描述

IFNar1小鼠是利用CRISPR/Cas9技術構建C57BL/6背景的IFNar1基因敲除小鼠。該小鼠缺乏的I型干擾素功能，干擾素作為抗御病毒的侵害的第一道防線，比機體的免疫反應早幾小時至幾天的時間發揮抗病毒作用，因此，IFN受體缺損的小鼠對病毒的感染變得特別敏感。

動物簡介

IFNar1基因敲除小鼠是通過利用CRISPR/Cas9 技術，對小鼠的IFNar1基因進行靶向修飾。

營養成分

粗蛋白≥23.0%、粗脂肪≥5.0%、粗灰分≤7.0%、粗纖維≤5.0%、水份≤10%、鈣1.4%～1.5%、磷1.0%～1.1%、賴氨酸≥1.32%、蛋氨酸+胱氨酸≥0.78%

生物學特性

1.生長曲線

2、解剖學特性與背景品系C57BL/6J相同。3、繁殖特性純合子之間同胞兄妹間繁殖，繁殖能力一般，每胎產5-7只。4、自發異常

不規則脾脾臟黑色素沉積

遺傳信息

1、靶基因位點選擇靶基因名稱：Interferon (alpha and beta) receptor 1 (IFNar1), 干擾素受體1基因ID號：15975； ENSEMBL號：ENSMUSG00000022967目標基因在ensembl網址鏈接：http://www.ensembl.org/Mus_musculus/Gene/Summary?g=ENSMUSG00000022967;r=16:91485238-91507441靶基因轉錄本：IFNar1基因有5個轉錄本，編碼蛋白大小為590aa。基因結構如下圖：

本研究以轉錄本IFNar1-201為對象進行基因編輯。 2、設計及構建質粒利用CRISPR/Cas9技術，針對目的基因的插入位點尋找靶序列，根據靶序列信息設計針對該位點的guide RNA，經活性檢測后，將具有活性的guide-RNA和Cas9體外轉錄成RNA，通過顯微注射將guide-RNA，Cas9 mRNA和重組DNA注射到受精卵中，從后代中篩選獲得基因定點插入的陽性小鼠。根據實驗目的和要求，結合IFNar1基因信息，采取如下策略：針對小鼠IFNar1基因轉錄本201的外顯子1設計guide-RNA。該外顯子序列信息為：GGCGGGGCGTCGCGGAGGGCCTAGCTGCCCAGAGGTAGTCTCCAGCTCCGCGGTGCTGCTGAGGAGAAGGAGGAGAATGTGAGCCGCCGCCCGGCCTCCCAAGACGATGCTCGCTGTCGTGGGCGCGGCGGCCCTGGTGCTGGTGGCCGGGGCGCCTTGGGTGCTACCCTCAGCTGCAG上述序列經crispr.mit.edu網站分析后，選擇可結合于IFNar1分子正鏈且編輯效率高、脫靶率低的一條gRNA（下換線，黃色為PAM區）作為使用對象。該gRNA具體信息為GCTGGTGGCCGGGGCGCCTT。 3、顯微注射及胚胎移植 gRNA經體外合成、轉錄后與Cas9 RNA一起注射入C57BL/6小鼠受精卵細胞，受精卵細胞移植供體ICR小鼠。