獲取試驗方案？獲取試驗報價？獲取試驗周期？

注意：因業務調整，暫不接受個人委托測試望見諒。

基本信息

品系名稱：B6-Trim25^tm1小鼠

英文名稱：B6-Trim25^tm1 mouse

疾病名稱：傳染性疾病、腫瘤

相關基因：Trim25

背景品系：C57BL/6J

遺傳類型：基因敲除

繁殖方式：HOM X HOM

繁殖代數：NA

研究用途：傳染性疾病、腫瘤等及信號轉導方面的研究。

飼養環境：屏障或隔離環境

培育單位：北京華阜康生物科技股份有限公司、中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

保種單位：中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

資源鑒定：否

鑒定日期：暫無介紹

特征描述

E3 泛素連接酶三基序( tripartite motif，TRIM) 家族的成員超過 70 個，其成員的 N 末端均包含有 1 個 RING結構域、B 盒結構域和卷曲螺旋結構域，此結構有助于確定底物的可變 C-末端特異性。TRIM 家族蛋白質在人體內具有多種作用，包括調控天然免疫中的信號轉導、防御病毒感染、調控細胞增殖和癌細胞的遷移。

研究表明 TRIM25、TRIM28、TRIM56 和 TRIM71 都能結合RNA，形成一個RNA結合的E3泛素連 接酶池。E3 泛素連接酶能催化結合其泛素部分的靶蛋白，根據泛素鏈的類型，E3 泛素連接酶池可具有不同的功能。其中研究最多的聚泛素鏈是K48 和K11，其形成的多聚蛋白鏈可以通過 26S 蛋白酶體來降解靶蛋白。同時也有研究表明其他聚泛素鏈如 K63 和單泛素，在信號傳導、蛋白定位和調節蛋白 － 蛋白質相互作用中具有重要作用。而 TRIM25 可以催化更多的蛋白添加到K48 和 K63 連接的多聚蛋白鏈上，在天然免疫反應中能夠靶向結合支架蛋白 14-3-3σ，從而起到降解病毒RNA的作用，同時還可作為針對病毒RNA 的下游效應物影響信號轉導。最近有研究表明 TRIM25 是一個 RNA 依賴性輔因子，可以調節 Lin28a/末端尿苷酰轉移酶( terminal uridylyl transferase，TUT) 4 基因介導的 let-7 前體尿苷化。

TRIM25 在子宮發育中的作用

在雌激素相關的細胞增殖和器官發育中 TRIM25不可或缺。TRIM25 首先由 Masami Muramatsu 團隊從人基因組 DNA 與雌激素受體( estrogen receptor，ER) 結合的區域中鑒定出來，并認為其是雌激素反應性指蛋白，并且在ER 陽性乳腺細胞中的表達上調。該團隊的另一項研究進一步確定了小鼠雌激素反應性指蛋白的同源物，并發現在 TRIM25 被破壞后小鼠仍能存活并且生長肥碩，但子宮對雌激素的反應性明顯降低，并且出現子宮不發育的情況。而 TRIM25 在雌激素應答中發揮作用的可能機制是: 在雌激素存在的情況下TRIM25 使ERα 泛素化，通過促進 ERα 與轉錄共激活劑 Tip60 的相互作用以增加 ERα 的轉錄活性，同時定位并導致 ERα發生降解。TRIM25 也調節其他參與雌激素反應的蛋白質，例如 TRIM25 可以參與形成自動調節反饋回路而調控抑癌基因 ATBF1 的表達水平。而作為一種共活化劑 ATBF1 與 ERα 競爭性表達，并且可以負性調節雌激素介導的細胞增殖。TRIM25 在轉錄因子和轉化生長因子 β 的 輔 因 子 KLF5 的降解過程中也具有類似的作用。

TRIM25 在腫瘤發生中的作用

TRIM25 與多種雌激素反應相關的癌細胞增殖有關。其中，在乳腺癌 MCF7 細胞中可檢測到 TRIM25 mRNA，并且在增加雌激素的刺激后其啟動子處的活性增加。此外，用反義RNA 敲低 MCF7 細胞的 TRIM25 表達后，將細胞植入雌性小鼠體內，發現乳腺癌的生長被抑制且抑制程度與TRIM25 表達量相關;進一步研究表明TRIM25 負責靶向結合陰性細胞周期調節劑 14-3-3σ，導致其降解，從而促進細胞增殖。研究表明，有 70% 乳腺癌患者癌組織中 TRIM25 表達陽性，其中 50% 的患者之癌組織 TRIM25 表達量高于相鄰正常組織，而癌組織中 TRIM25 的表達水平與雌激素水平并不相關，說明TRIM25 可以逃逸雌激素介導的表達調控。同時，TRIM25 免疫反應性與乳腺癌患者的預后不良具相關性。此外，在卵巢、胃和肺癌等腫瘤中 TRIM25 蛋白也呈過表達，但在子宮內膜癌中表達下調。TRIM25 可通過多種方式促進癌細胞增殖和遷移。有學者發現 TRIM25 作用于 p53 /鼠雙微體 2 的環路。通過 RNA 干擾技術敲除肺癌細胞中的 TRIM25 能抑制肺癌細胞增殖、腫瘤發生和細胞遷移，而此時 p53 表達水平增加。另有學者發現 TRIM25 實際上通過抑制鼠雙微體 2 和 p300 的結合來增加 p53 和鼠雙微體 2 的水平，在這個過程中 p53 泛素化是必需的步驟; 同時也發現在 TRIM25 存在的情況下 p53 的活性、促凋亡和DNA 損傷修復的能力都降低，下調 TRIM25 將導致 p53的乙酰化增加，從而增加細胞凋亡。TRIM25 也能通過轉化生長因子 β 途徑在胃癌細胞的遷移和侵襲中起作用，而對細胞增殖無影響; 敲低胃癌細胞中的 TRIM25表達能降低遷移相關蛋白( 如基質金屬蛋白酶-2 和基質金屬蛋白酶-9) 和黏附相關蛋白質( 如 β-連環蛋白和纖連蛋白 1) 的水平，增加另一種黏附相關蛋白-E-鈣黏蛋白的水平; 當 TRIM25 敲低時，轉化生長因子 1 和骨形態發生蛋白-4 表達水平也降低，而當細胞被轉化生長因子 1抑制劑干預時 TRIM25 依賴性增加，細胞遷移和黏附活動也會消失。以上這些研究表明 TRIM25 不僅具有穩定蛋白質的作用也有靶向降解蛋白質的作用【1】。有報道指出TRIM25是一種新型的內質網應激誘導蛋白,并且可以負反饋調節內質網應激。在內質網應激時,TRIM25通過調節Keap1/Nrf2信號通路間接調控ERAD反應:首先降低Keap1的蛋白穩定性,然后促進Nrf2入核,激活抗氧化通路,進而抑制細胞ROS水平上調并促進ERAD反應,ROS水平下調和ERAD反應增強共同促進腫瘤細胞的存活。此外,動物實驗結果表明TRIM25敲低可以有效抑制體內腫瘤的生長。因此TRIM25是調控ERAD反應的重要蛋白,有望成為臨床上腫瘤診斷及治療的新靶點【5】

TRIM25 在天然免疫中的作用

TRIM 家族的許多蛋白質( 包括 TRIM25) 被發現在視黃酸誘導基因( retinoic acid-inducible gene，RIG) -1 介導的干擾素對病毒RNA的反應中具有重要作用。RIG-1 是一種胞質模式識別受體，它通過 5&39;-三磷酸識別病毒 RNA 分子。當檢測到 5&39;-三磷酸-ＲNA 時，RIG-1通過線粒體抗病毒信號蛋白、蛋白激酶 TANK 結合激酶和 IκB 激酶啟動下游信號通路，使轉錄因子干擾素調節因子 3 磷酸化從而介導二聚化，最終使Ⅰ型干擾素表達。TRIM25 能引起 RIG-1 的兩個胱天蛋白酶募集結構域( caspase recruitment domain，CARD) 之一的 K63 連接泛素化，這是 RIG-1 有效募集其下游的線粒體抗病毒信號蛋白以及由此引起的引起有效干擾素反應所必需的［22］。當 RIG-1 檢測到 5&39;-三磷酸-ＲNA 后即發生構象變化，暴露第一 CARD，允許其與 TRIM25 相互作用，隨后泛素化第二 CARD。而不與 TRIM25 結合的突變體CARD 不被泛素化，RIG-1 也失去其對下游信號傳導的能力。RIG-1 也可以通過 CARD 依賴性結合短的且未錨定的多聚泛素鏈而被激活，而這些泛素鏈由 TRIM25 產生。研究表明 TRIM25 導致 RIG-1 的泛素化是抑制干擾素應答的主要目標，例如甲型流感病毒蛋白 NS1 可以通過阻斷 TRIM25 介導的 RIG-1 CARD 泛素化，而使病毒避免觸發干擾素反應。不能阻斷泛素化的突變體 NS1 就不能阻止 RIG-1 信號傳導，并導致甲型流感蛋白的毒力喪失。這種抑制效果在不含 RNA 結合結構域( RNA binding domain，ＲBD) 的 NS1 突變體中也明顯減弱。抑制 RIG-1 泛素化的另一種機制取決于線性泛素裝配復合物，其包含有 RING-IBR-RING 結構域的E3 連接酶 HOIP 和 HOIL-1L。線性泛素裝配復合物可充當負反饋調節劑，同時通過與 TRIM25 競爭性結合及靶向結合 RIG-1 后，經由蛋白酶體的降解以關閉 RIG-1【1】。

TRIM25在調控RNA代謝中的作用

在早期研究中，已鑒定出約 400 種哺乳動物中的RNA 結合蛋白( RNA-binding protein，RBP)。最近，隨著高通量檢測方法如互動體 RNA 蛋白捕獲技術的發展，識別的RBP 數可達數百個，其中許多均沒有經典的RBD。其中在 HeLa 細胞中鑒定出 860 個 RBP，其中一半沒有規范的RBD，且有31 個新型RBP能否結合RNA 以及與RNA 已知功能的關系均未能確定。TRIM25 是在 HeLa 細胞、HEK293 細胞和小鼠胚胎干細胞中鑒定出的新型 RBP 之一。此外，其他 TRIM家族成員也被認為能與 RNA 結 合，包 括 TRIM28、TRIM56 和 TRIM71。目前，已經發現 TRIM25 和TRIM71 能通過不同的 RBD 結合 RNA，其中 TRIM71 是通過由 Ncl-1、HT2A 和 Lin-4 三重結構域組成的 NHL 重復序列進行結合，而 TRIM25 則是利用其包含卷曲螺旋結構域的中間部分。這兩種蛋白在小鼠 ES 細胞中大量表達，并且其表達模式遵循干細胞特異性因子 Lin28 和Oct4 分化減量化的表達模式。TRIM25 蛋白的突變會導致發育時序的缺陷，并加速體細胞和生殖細胞的分化。當 TRIM25 被發現是調節 Lin28a /TUT4 介 導 let-7a-1 前體尿苷化的輔因子時，其重要性更為凸顯。TRIM25 的泛素化和蛋白穩定性是 Lin28a /TUT4 介導的尿苷化所必需的，其可能通過橋接 Lin28 和 TUT4 或輔助 RNP 復合物的形成而發揮作用，也有可能通過泛素化負調節和阻斷蛋白質的尿苷化，并通過蛋白酶體將其靶向降解。Lin28a 是在許多物種中具有表達的一種保守蛋白，最初被發現于秀麗隱桿線蟲，其在后生動物胚胎發育的早期階段表達豐富，并可抑制微小 RNA let-7 家族的表達。而隨著胚胎發育Lin28a 表達逐漸受限，在分化程度更高的細胞中其抑制let-7 家族的作用也逐步減輕。Lin28a 對 let-7 的抑制作用是基于其與 let-7 前體的保守末端環的相互作用，這為 TUT4 和來自 TUT 家族的其他成員提供了一個將多聚尿苷酸尾部添加到 let-7 前體中以進行催化反應的平臺，而聚尿苷化最終導致 let-7 前體的不穩定和成熟 let-7 減少。TRIM25 可與 let-7a-1 結合，使得后者在 Lin28 存在時可更有效地尿苷化。這表明TRIM25 的 ＲNA 結合能力對 let-7 前體的加工和穩定性具有重要作用，但需要進一步研究以確定這種效應的發生機制以及是否需要 TRIM25 的泛素化活性。為了進一步了解 TRIM25 作為 RBP 的作用，需要識別 TRIM25 結合的 RNA 以及與其相互作用的 RNA 蛋白復合物，特別是通過病毒 RNA 激活 RIG-1 的機制。我們假設 TRIM25 與 RNA 的結合可導致相鄰 RBP 的泛素化，當具有多種剪切體的 ＲBP 結合于 ＲNA 蛋白復合物附近的 RNA 時，TRIM25 會修飾 RNA 蛋白復合物從而以微調的方式改變其分子功能; 另外在 RIG-I 信號轉導的作用下，RNA 可以使 TＲIM25 更接近 RIG-1，使其能夠泛素化 RIG-1 并激活下游信號傳導途徑; 或者 TRIM25與 RNA 結合可能阻礙其與 RIG-1 的隔離而激活 RIG-1信號傳導的能力。因此，驗證 TRIM25 的 RNA 結合能力在其調節細胞周期或雌激素應答 中的重要性也很有意義【1】。

有文獻報道了TRIM25在抗病毒天然免疫中的作用及惡性腫瘤發生發展中的作用。補充了上述文獻不足【2】。

TRIM25與惡性腫瘤TRIM25 作為先天免疫的關鍵調節因子，參與NF-κB 與 IFN 等天然免疫信號的調節。NF-κB 廣泛存在于細胞中，除了作為炎癥調節因子外，與腫瘤細胞分化、增殖、凋亡、免疫應答等應激反應息息相關。Ⅰ型 IFN 在腫瘤細胞的免疫監控、抑制細胞增殖和免疫調控等方面也有著重要的作用。近年來已發現 TRIM25 在肺癌、前列腺癌、肝癌等惡性腫瘤中發揮重要作用【2】。

動物簡介

營養成分

生物學特性

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準。

3.關于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（B6-Trim25tm1小鼠,動物試驗）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。